时间:2016-10-24 09:31来源:普瑞养生网
土鳖虫的鉴别
①本品粉末灰棕色。体壁碎片深棕色或黄色,表面有不规则纹理,其上着生短粗或细长刚毛,常可见刚毛脱落后的圆形毛窝,直径5~32μm;刚毛棕黄色或黄色,先端锐尖或钝圆,长12~270μm,直径10~32μm ,有的具纵直纹理。横纹肌纤维无色或淡黄色,常碎断,有细密横纹,平直或呈微波状,明带较暗带为宽。
②( 2 )取本品细粉 1g ,加甲醇 25ml ,超声提取 30 分钟,滤过,滤液蒸干,加甲醇 5ml 使溶解,作为供试品溶液。另取土鳖虫对照药材 1g ,同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典 2000 年版一部附录 VI B )试验,吸取上述两种溶液各 10μl ,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶 G 薄层板上,以甲苯 - 二氯甲烷 - 丙酮( 5 : 5 : 0.5 )为展开剂,展开,取出,晾干,在紫外光灯( 365nm )下检视。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。喷以香草醛硫酸试液, 105 ℃ 烘至斑点清晰。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。
【含量测定】尿囊素 照高效液相色谱法(中国药典 2000 年版一部附录 Ⅵ D )测定。
色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈( A ) -0.1% 醋酸( B )(用氨水调 pH 值至 5.6-6.0 )为流动相,采用梯度洗脱: 0min , 25%A ; 10min , 25%A ; 15min , 80%A ; 20min , 80%A ; 21min , 25%A ;检测波长 360nm 。理论板数按尿囊素 A 峰计,应不低于 1500 。
对照品溶液的制备 精密称取尿囊素对照品置量瓶中,加 0.02mol/L 盐酸溶解,制成每 1ml 含尿囊素 50μg 的溶液。精密吸取上述溶液 5ml ,置 10ml 量瓶中,加 0.6mol/L 氢氧化钠 2ml ,于 85 ℃ 水浴中水解 60 分钟,再加 1mg/ml 的 2 , 4- 二硝基苯肼(溶于 2mol/L 盐酸中) 2ml ,继续于 85 ℃ 反应 20 分钟;待溶液冷却至室温后加 0.02mol/L 盐酸至刻度,摇匀,即得。
供试品溶液的制备 取本品细粉,混匀,精密称取约 0.5g ,加入甲醇 25ml ,超声处理(功率 250W ,频率 40KHz ) 45 分钟,滤过,滤液挥干,加 5ml 乙醚洗涤残渣,弃去乙醚;残渣挥干后用 0.02mol/L HCl 5ml 分次溶解残渣并转移至 10ml 量瓶中,加 0.6mol/L 氢氧化钠 2ml ,于 85 ℃ 水浴中水解 60 分钟,再加 1mg/ml 的 2 , 4- 二硝基苯肼(溶于 2mol/L 盐酸中) 2ml ,继续于 85 ℃ 反应 20 分钟;待溶液冷却至室温后加 0.02mol/L 盐酸至刻度,摇匀,即得。
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10μl ,注入高效液相色谱仪,测定,即得。
本品含尿囊素( C 4 H 6 N 4 O 3 )应不 少 于 0.035% 。